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大小分子個個出,只緣身在SEC柱中

更新時間:2019-07-05 點擊次數(shù):3399

 

根據(jù)供試品中分子量大小分離化合物的,較大分子量的化合物會被填料較小的細(xì)孔排除在外而達(dá)到分離稱為體積排阻色譜法。當(dāng)采用水溶液或者緩沖鹽作為流動相的,稱為凝膠過濾色譜法-GFC,當(dāng)流動相是有機溶劑時,稱為凝膠滲透色譜法-GPC。SEC是簡單的色譜,其保留時間取決于溶質(zhì)分子進(jìn)出固定相孔結(jié)構(gòu)的相對滲透性,供試品中不同化合物分子是根據(jù)體積不同來進(jìn)行分離。

供試品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔洞,因而早被洗脫出來,中分子量的化合物分子能進(jìn)入凝膠中一些較大的孔,因而在柱中的保留增強,洗脫時間延長,而小分子化合物可以進(jìn)入凝膠中大部分孔洞,具有更強的保留,洗脫速度顯著變慢,其中溶劑分子由于分子量小,在分離過程中會進(jìn)入凝膠的所有孔洞,因而后被洗脫出來,從而達(dá)到不同分子量的化合物的分離。

月旭Xtimate SEC是硅膠基質(zhì)的體積排阻色譜柱,采用*的化學(xué)鍵合技術(shù),在硅膠表面鍵合了親水性聚合物以及親水性二醇基官能團(tuán),雙重鍵合基質(zhì)使得水溶性高分子聚合物蛋白、生物酶、多肽等生物樣品的非特異性吸附很小,因而可以廣泛應(yīng)用于水溶性聚合物及生物大分子的分離和測定。

 

Xtimate SEC色譜柱的特性:

  • 由含二醇基官能團(tuán)的剛性球形微球表面鍵合親水性高分子聚合物所組成;
  • 色譜柱為5μm或3μm的硅膠微球,能夠獲得高的分離效率;
  • Xtimate SEC 120Å等小孔徑的色譜柱適合分離頭孢類等極性目標(biāo)物,300Å適合分離蛋白、多肽等生物大分子;
  • Xtimate SEC產(chǎn)品有120Å、300Å、700Å和1000Å四種孔徑規(guī)格的色譜柱。

 

在介紹完月旭的Xtimate SEC色譜柱之后,相信大家對我們這類產(chǎn)品的特性有了較深的了解,無圖無真相,下面就讓我們拭目以待吧。

 

頭孢米諾鈉和頭孢地嗪鈉聚合物雜質(zhì)測定

色譜條件

色譜柱:Xtimate® SEC-120 (7.8*300mm,5μm)

流動相:0.005mol/L磷酸緩沖液(pH7.0)-乙腈=95:5

檢測波長:254nm;流速:0.8ml/min;柱溫:室溫;進(jìn)樣量20μL。

 

1、頭孢米諾鈉

序列進(jìn)樣

樣品溶液第1針

 

樣品溶液第10針

 

樣品溶液第100針

 

樣品溶液第200針

 

重疊圖譜

 

結(jié)論

 

從結(jié)果可以看出,200針后,主峰前雜質(zhì)與主峰分離度為3.487大于1.50,滿足方法要求。

 

2、頭孢地嗪鈉

序列進(jìn)樣

 

樣品溶液第1針

 

樣品溶液第10針

 

樣品溶液第100針

 

樣品溶液第200針

 

重疊圖譜

 

結(jié)論

從結(jié)果可以看出,200針后,主峰前雜質(zhì)與主峰分離度為2.943大于1.50,滿足方法要求。

月旭Xtimate SEC*的鍵合技術(shù),*的穩(wěn)定性,不同的孔徑大小能滿足您不同的做樣需求。選擇Xtimate SEC,選擇月旭,就是選擇信任。

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